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大概需要1-2ug即可。
有慢病毒载体:pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP和pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro.可以问下客户的研究目的. 如果客户做蛋白的建议还是不要建议这两个载体。
转染细胞一般用flag检测表达情况。如果有标签可以做WB来鉴定是否表达。用荧光载体或QPCR检测是否转染细胞。若质粒没有加荧光可以用QPCR检测。
1、引物 更换引物尝试,设置阳性对照(其他同载体的质粒)和阴性对照(空载体)看是否引物问题。 2、PCR扩增体系 一般问题不大,可以看下退火温度等信息。 3、抗性是否加错,抗性浓度是否正常。
选择合适的表达系统需考虑蛋白质的大小、复杂性、翻译后修饰需求、表达量和纯度要求。原核系统适用于简单蛋白,哺乳动物系统适用于复杂蛋白。
包涵体形成通常是由于蛋白质在细胞中错误折叠导致的。这可能与蛋白质的结构复杂性或高表达量有关。
内毒素可以通过内毒素去除柱、离子交换色谱等方法去除,确保最终产品的纯度和安全性。
定点突变技术被广泛地应用于蛋白质功能位点结构研究、酶活性优化、DNA元件功能或元件互作、基因治疗等方面。
是的,我们的定点突变服务可以在DNA的任何位点引入突变。
可能为误操作,请按照说明书操作步骤重复检测,并确认样本中添加的裂解和萃取试剂浓度在推荐范围内。也可能是检测卡超过效期,请使用效期内的检测卡。
当样本浓度低于检测卡的工作浓度范围下限时,可降低样本稀释倍数,稀释后重新检测;当样本浓度高于检测卡的工作浓度范围上限时,可以进行二次稀释使其浓度符合检测卡的工作范围。
说明待测样本中不含有标签蛋白。检查是否使用了与待测样本对应的检测卡,或者通过ELISA或WB方法验证标签蛋白的存在。